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技术文献

玉米赤霉烯酮ELISA试剂盒样本处理方法 及注意事项

阅读次数:1350    发布时间:2019/12/25 15:50:14

 玉米赤霉烯酮elisa试剂盒样本处理方法 
 
1)称取2g粉碎样品于50ml离心管中,加16ml样本提取液,振荡5分钟,室温4000转/分离心10分钟;
 
2)取0.5ml上清,加入2ml去离子水,混匀;(对于毒素含量极高的样本,可先取0.1ml上清加入0.9ml样本提取液混匀,再加去离子水4ml。zui终样本稀释倍数为400,检测下限为120ppb。)
 
3)取50μl进行分析。
 注意事项
1 室温低于25℃或试剂及样本没有回到室温(25℃)会导致所有标准的OD值偏低。
2 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
 
3 混合要均匀,洗板要彻底,在ELISA分析中的再现性,很大程度上取决于洗板的一致性。
 
4 在所有孵育过程中,用盖板膜封住微孔板,避免光线照射。
 
5 不要使用过了有效期的试剂盒,不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
 
6 显色液若有任何颜色表明变质,应当弃之。0标准的吸光度值小于0.5个单位(A450nm< 0.5 )时,表示试剂可能变质。
 
7 反应终止液有腐蚀性,避免接触皮肤。
标准曲线的绘制与计算
 
    以标准液百分吸光率为纵坐标,对应的标准液浓度(ppb)的对数为横坐标,绘制标准液的半对数曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中,从标准曲线上读出样本所对应的浓度,乘以其对应的稀释倍数即为样本中待测物的实际浓度。
 
    若利用试剂盒专业分析软件进行计算,更便于大量样本的准确、快速分析。(索取)

原创作者:上海谷研实业有限公司

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