无乳支原体LAMP试剂盒的间接法:1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。
2.次日洗涤3次。
3.加定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,后遍用DDW洗涤。
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
注意事项:
1. 无乳支原体LAMP试剂盒50次建议使用新鲜采取的动物组织,若为长期冷冻组织,应尽量避免反复冻融,否则会导致模板的降解,影响PCR效率。
2. 试剂Buffer AL若低温保存,易产生沉淀。在使用务必将其在室温中放置段时间,也可在37℃水浴中预热10 min,以溶解沉淀,混匀后再使用。
3. 电泳检测时,切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否则,电泳时会在泳道中出现大团拖尾亮带,影响实验结果。
4. 建议扩增片段长度1 kb以内,以便扩增效率佳。
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴次性手套操作。
猪胆固醇7α羟化酶ELISA检测试剂盒
猪蛋白激酶AELISA检测试剂盒
猪低密度脂蛋白ELISA检测试剂盒
猪低氧诱导因子-1αELISA检测试剂盒
猪抵抗素ELISA检测试剂盒
猪端粒酶ELISA检测试剂盒
猪对称性二甲基精氨酸ELISA检测试剂盒
猪多聚免疫球蛋白受体ELISA检测试剂盒
猪多杀性巴氏杆菌毒素ELISA检测试剂盒
猪儿茶酚胺ELISA检测试剂盒
猪二胺氧化酶ELISA检测试剂盒
猪肥胖抑制素ELISA检测试剂盒
猪分泌型磷脂酶A2ELISA检测试剂盒
猪分泌型免疫球蛋白AELISA检测试剂盒
猪钙非依赖型磷脂酶A2ELISA检测试剂盒
猪甘油三酯ELISA检测试剂盒
猪高密度脂蛋白ELISA检测试剂盒
猪睾酮ELISA检测试剂盒
猪钩端螺旋体IgG抗体ELISA检测试剂盒
原创作者:上海谷研实业有限公司