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技术文献

微小染色体维持缺陷蛋白3抗体MCM3 的生物素化标记实验要点

阅读次数:916    发布时间:2021/6/22 14:14:15

微小染色体维持缺陷蛋白3抗体MCM3 的生物素化标记实验要点:
1.如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析;
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选适条件;
3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活;
4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等;
5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性;
6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合;
7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用;
8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。
人 PDGFRb / CD140b ELISA配对抗体
人 CD200 ELISA配对抗体
人 PRLR / Prolactin Receptor ELISA配对抗体
人 MMP-9 / CLG4B / MMP9 ELISA配对抗体
人 CEACAM1 / CD66a ELISA配对抗体
人 IL20RA / IL20R1 ELISA配对抗体
人 Hemopexin / HPX ELISA配对抗体
人 TrkA / NTRK1 ELISA配对抗体
人 CD146 / MCAM / MUC18 ELISA配对抗体
人 TIMP1 / EPA / CLGI ELISA配对抗体
人 IL12B / NKSF2 / p40 ELISA配对抗体
人 IL18BP / IL18BPa ELISA配对抗体
人 JAM-A / F11R ELISA配对抗体
人 Granulin / GRN / Progranulin ELISA配对抗体
人 COMP / TSP5 ELISA配对抗体
人 DKK3 / Dkk-3 / REIC ELISA配对抗体
人 vWF / von Willebrand Factor ELISA配对抗体
人 PD1 / PDCD1 / CD279 ELISA配对抗体
人 CD48 / SLAMF2 / BCM1 ELISA配对抗体
人 CD157 / BST1 ELISA配对抗体
人 CD32b / FCGR2B ELISA配对抗体
人 Fetuin-A / AHSG / FETUA ELISA配对抗体
人 CEACAM6 / CD66c ELISA配对抗体
人 IL6R / CD126 ELISA配对抗体
人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 ELISA配对抗体
人 MICB / MIC-B ELISA配对抗体
人 IGF1R / CD221 / CD221 ELISA配对抗体
甲型流感 H5N1 (禽流感) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配对抗体
 

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