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胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)免疫组化试剂盒实验步骤:
1.烤片: 将待做切片置于切片架上,于60℃恒温烤箱中至少烤1 hr;石蜡包埋组织切片3~4μm 厚度
2.脱蜡: 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片经下行酒精水化,无水乙醇5min,95%乙醇2 次(每次2min),85%乙醇2 min;75%乙醇2min,自来水冲洗,ddH2O 洗2×2min;
4.抗原修复: 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复,常采用高压、微波(温度达到98~100℃)或酶消化修复法,室温自然冷却,自来水冲洗,ddH2O 洗2×2min,TBS 洗涤(2×2min)(具体修复方法见附1)* 注:有些抗原勿需修复,
直接进入第5 步封闭。
5.封闭: 滴加试剂B,37℃湿盒孵育30 min;
6.加一抗:滴加用试剂C(即用型一抗),37℃湿盒孵育2 hr 或4℃过夜;
7.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
8.封闭: 滴加试剂B,37℃湿盒孵育10 min;
9.加二抗: 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗(试剂D),37℃湿盒中孵育30 min;
10.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
11.封闭: 滴加试剂Tween 20,37℃湿盒孵育封闭20 min;
12.加HRP-SA: 滴加用抗体稀释液稀释的试剂E(1:50~200,终浓度5~20 nM),
37℃湿盒中孵育30 min;
13.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min),TBS 洗涤(2×5 min);
14.显色:应用DAB 溶液(试剂F)显色;
15.复染:自来水充分冲洗,复染,脱水,透明;
16.封片: 待组织标本干后,用试剂缓冲甘油封固剂封片;
17.观察成像: 显微镜下观察成像。
β淀粉样蛋白体蛋白结合蛋白2抗体
早老素稳定因子样蛋白/γ分泌酶组件蛋白APH1抗体
磷酸化蛋白激酶AKT1抗体
磷酸化蛋白激酶AKT1抗体
ASH1L蛋白抗体
α2C-AR肾上腺素能受体抗体
中心体蛋白AZI1抗体
α蛋白激酶3抗体(心肌)
表皮型脂氧合酶3抗体(鱼鳞病相关蛋白)
锚蛋白重复域28抗体
淋巴细胞相关AF4样蛋白抗体
锚蛋白重复结构域蛋白12抗体
锚蛋白重复结构域蛋白13A抗体
锚蛋白重复结构域蛋白9抗体
锚蛋白重复及SAM结构域蛋白1A抗体
脂肪特定转录因子2抗体
载脂蛋白L3抗体
肿瘤/抗原81抗体
共济失调蛋白7样2抗体
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