活性测试是如何使用的？

阅读次数：1110    发布时间：2018/4/9 10:00:12

活性测试是如何使用的？这个问题困扰了很多老师。根据我司的细心探讨，终于得出结论。活性测试该如何使用呢？

测定原理基于Caspase-1特异水解多肽底物Tyr-Val-Ala-Asp-p-nitroanilide (YVAD-pNA)，释放的游离硝基苯胺pNA在405 nm有吸光度。采用可见光光度比色法测定pNA而得到Caspase活性。适用于检测哺乳动物组织、细胞Caspase-1活性。

根据样品测定操作：

1. 按下表设置96孔板反应体系。底物*后加入以使各管反应起始时间相同。设置不加样品的空白对照管。酶活力不足或过高，可增加或减少样品。

2. 盖紧96孔板盖子并用封口膜密封。37 ºC反应2小时，肉眼可见颜色变黄时的OD405值约为0.2，此时即可测定。颜色变化不明显可延长反应或过*，但酶活性较强时，孵育时间过长将导致反应失去线性关系。

3. 样品管OD405减去空白对照OD405，为样品Caspase水解底物产生的pNA吸光度。根据标准曲线计算其含量，并以蛋白浓度校正之。

4. 测得的Caspase酶活性表示方法有两种。(1) Caspase活性增加的百分比：100% × 实验处理组OD / 实验对照组OD，简单而可靠。(2)样品Caspase酶活力单位/mg protein，精确但计算较复杂，参见说明。

Azithromycin Identity 75mg 阿奇霉素标准品(定性用) 83905-01-5
Azithromycin N-Oxide 15mg 阿奇霉素-N-氧化物标准品 90503-56-3
Azo-aminoglutethimide 100mg 偶氮-氨鲁米特标准品
Aztreonam 200mg 氨曲南标准品 78110-38-0
Aztreonam E-Isomer 50mg 氨曲南E异构体标准品
Bacampicillin Hydrochloride 200mg 盐酸巴氨西林标准品 37661-08-8
Bacitracin Zinc 200mg 杆菌肽锌标准品 1405-89-6
Baclofen 350mg 巴氯芬标准品 1134-47-0
Baclofen Related Compound A 50mg 巴氯芬相关物质A标准品 22518-27-0
Balsalazide Disodium 200mg 巴柳氮钠标准品 150399-21-6
Balsalazide Related Compound A 100mg 巴柳氮钠相关物质A标准品