随着越来越多的研究人员在实验中加入了细胞分选,流式细胞仪的实验室就变得拥挤不堪。尽管免疫学家一直是这项技术的主要用户,但在细胞分选仪的预约名单上,其他领域的研究人员也日渐增多,这使得
仪器的预约使用近乎饱和。有人打趣说,用上一台细胞分选仪,就像在闹市区找个停车位那么难。
然而,尽管有些用户需要高度复杂的分选,来获得特定的细胞群,但对于半数以上的用户,他们的分选需求要简单得多。一些分子生物学家刚刚进入这一领域,他们只是希望通过1-2个荧光蛋白或标记抗体来进行分选。根据Bio-Rad的调查,许多客户只是对特定细胞类型的特定蛋白感兴趣,或是希望分离表达GFP的所有细胞,仅此而已。对于他们而言,简单易用的分选仪可能是个更理想的选择。
Bio-Rad的S3细胞分选仪就是为满足这一群体的分选需求而设计的。它是一台高度自动化的系统,*多能检测四种颜色,且体积小巧,大小仅为70 x 65 x 65 cm(宽x深x高),可放置在实验台上。这台仪器内置了液流和温控装置,因此无需其他的台面空间。
对于传统的细胞分选仪,技术人员往往需要几个月的培训,才能熟练地开展操作。但小型的实验室可能没有专门的人员来负责这个,或由于人员流动而出现断层。然而,有了S3细胞分选仪,这就完全不成问题。它的细胞分选操作相对简单,不需要专门的技术人员来完成。之前,土耳其的一个研究小组需要开展细胞分选,但他们没有任何经验。而在使用S3后仅一个星期,他们就能自由地操作。
分选原理
S3采用的是经典的jet-in-air(在空气中激发)的技术进行分选的。为了从多元化的细胞群体中获得感兴趣的细胞,研究人员首先要利用生物标志物标记细胞。然后让单细胞悬液通过流动柱,用激光照射,并将其分割成微小的液滴,每个都包裹着一个细胞。根据荧光信号,液滴在经过偏转板之前被带上不同的电荷。当液滴经过偏转板时,在高压电场的作用下偏转,落入各自的收集容器中。此过程每秒重复数万次,实现大量细胞的快速、高效分选。
细胞分选过程的简化,不仅能提高实验室的效率,也有望实现新的应用。Kulisch说:“随着人们更深入了解这种技术,他们更有可能提出这样的问题,‘细胞分选是否会带来不同?’。也许这个问题会带来遗传过程的发现,或让人了解到一个细胞群体比另一个更容易受到治疗的影响。这可能有助于人们更好地了解疾病状态。”(