人中性粒细胞分离液试剂盒 注意事项:
A. 本分离液是敏光型的,在运输和贮藏过程中应在 18℃-25℃避光保存,启封后置 4℃保存避免微生物污染。另外,本品为真空包装,未启封前置于 10℃ 以下易出现白色结晶,影响分离效果。
B. 待分离的血液、组织及细胞要求新鲜,避免冷冻和冷藏。分离液和所分离样本一定在20℃水浴箱中复温20分钟保证分离液和所分离样本温度在20℃±2℃时分离效果,且所有操作过程一定要在无菌条件下进行。
C. 由于各品牌
离心机的性能不同,国内南北地区温度环境和四季的差异,可能影响分离效果,用户可以调节离心转数,调节离心的时间,摸索zui佳的分离条件(具体分离条件各实验室自定)。
D. 使用无静电反应的离心管,推荐使用未经过碱处理的玻璃离心管。
E. zui优抗凝剂选择:EDTA、枸橼酸、肝素。应注意在血液稀释过程中应去除抗凝剂体积。
F. 分离过程中所用其他试剂如:羟乙一基淀粉 550、全血及组织稀释液、细胞洗涤液及红细胞裂解液等以我公司产品为zui优选择,本公司相关系列产品无菌、无病毒、无支原体、低内毒素水平且无细胞毒性,所获得的细胞可保持完好的生物活性和完整的细胞形态。
计数与计算过程
1)、在细胞计数板中央放置计数专用的盖玻片。
2)、用玻璃虹吸管吸取细胞,让虹吸管在盖玻片上或下侧的计数板凹蹧处流出悬液,至盖玻片被液体充满为止。
3)、置显微镜下计数四角大方格内的细胞总数。对于压线的细胞只计数在上线和左线者,对于细胞团按单个细胞计数。
4)、按下式计数细胞悬液的密度:
细胞密度=(4 个大格细胞总数/4)×104个/ml×稀释倍数
公式中乘以 104因为计数板中每一个大格的体积为:1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1m(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3细胞计数要点: 细胞计数要点