首先,植物细胞外面有细胞壁,因此需要先用纤维素酶和果胶酶去壁,形成原生质体后,才能进行细胞融合。其次,植物细胞融合后形成的杂种细胞,经过培养有可能先脱分化发育成愈伤组织然后再分化为植物体,而动物细胞的杂种细胞则缺乏此种能力。植物体细胞融合的过程大致包括:细胞分离,原生质体制备,原生质体融合,杂种细胞筛选及其培养,然后再通过愈伤组织诱导分化出根、茎、叶,*后长成完整的体细胞杂种植株。植物细胞融合技术不仅打破了常规有性杂交育种的亲和性障碍,而且为实现“超远缘杂交”提供了可能,有重大的应用价值。
细胞融合操作步骤
(1)细胞准备。分bai贴壁和悬浮细胞两种,du前者可直zhi接将两亲本细胞混合培养,后者需制成一dao定浓度的细胞悬浮液。
(2)细胞融合。加促融因子于将行融合的细胞之中,诱导融合。
(3)杂种细胞选择。利用选择性培养基等,使亲本细胞死亡,而让杂种细胞存活。
(4)杂种细胞克隆。对选出的杂种细胞进行克隆(选择与纯化),经过培养,就能获得所需要的无性繁殖系。
细胞融合不仅可用于基础研究,而且还有重要的应用价值,在植物育种方面已经成功的有萝卜+甘蓝、粉蓝烟草+郎氏烟草、番茄+马铃薯等等。 而动物细胞融合技术*重要的用途是制备单克隆抗体。
原理:细胞膜具有一定的流动性