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公司新闻

小鼠皮肤黑色素瘤细胞;B16-F10培养细胞株培养的具体无菌技术要点

阅读次数:673    发布时间:2021/6/15 16:47:47

小鼠皮肤黑色素瘤细胞;B16-F10培养细胞株培养的具体无菌技术要点:
1. 实验开始,无菌室和无菌操作台需要紫外光照射30到60分钟完全灭菌,用70%ethanol擦拭无菌操作台面,并且打开无菌操作台风扇运行10分钟之后,才可以进行实验操作。每次操作只能处理一株细胞株,即使培养基完全相同也不可共用培养基,以避免细胞间污染或失误混淆。实验完成后,请将实验物品拿出工作台,用70%ethanol再次擦拭无菌操作台面。操作间隔应该让无菌操作台运转10分钟到15分钟后,才能进行下一个细胞株的操作。
2. 无菌操作工作的区域应保持清洁和宽敞,必要物品(试管架、吸管、吸取器或吸管盒等)可以暂时放置,其它实验用品使用完毕后应移出,有利于空气流通。实验用品需70%ethanol擦拭后方可带入无菌操作台内。实验操作过程应在台面的中央无菌区域内完成,请勿在边缘非无菌区域进行操作。
3. 小心取用无菌实验物品,避免细菌污染。请勿触碰吸管尖头部和容器瓶口处,也不要在打开的容器正上方进行操作。容器打开后,请用手夹住瓶盖并轻握瓶身,倾斜大约45°角取用,尽量不要将瓶盖口朝上放置于桌面。
4. 工作人员应当先注意自身安全,必须穿戴齐实验衣和实验手套后才能进行实验。对于病毒感染或是来自人类的细胞株应当特别小心操作,并选择适当等的无菌操作台进行(至少是Class II)。操作过程中,应避免引起aerosol的产生,小心有毒性药品,例如DMSO和TPA等,并避免针头的伤害等等。
5. 定期检测下列项目:
5.1. CO2钢瓶的CO2压力
5.2. CO2培养箱的CO2浓度、温度、和水盘是否有污染(水盘的水需用无菌水,每周定时更换)。
5.3. 无菌操作台内的airflow压力,定期更换紫外线灯管和HEPA过滤膜,预滤网(300小时/预滤网,3000小时/HEPA)。
6. 水槽内可添加消毒剂(Zephrin 1:750),需定期更换水槽中的水。
HCT8/V人结肠癌长春新碱耐药株
HL-60/Adr人白血病阿霉素耐药株
K562/Adr人白血病阿霉素耐药株
A2780/Adr人卵巢癌阿霉素耐药株
HO-8910/ADR人卵巢癌阿霉素耐药株
lovo/Adr人结肠癌阿霉素耐药株
MCF7/Adr人乳腺癌阿霉素耐药株
BEL/Adr人肝癌阿霉素耐药株
SGC7901/Adr人胃癌阿霉素耐药株
BIU-87/Adr人膀胱癌阿霉素耐药株
A549/Adr人肺癌阿霉素耐药株
HL-60/Taxol人白血病紫杉醇耐药株
K562/Taxol人白血病紫杉醇耐药株
A2780/Taxol 人卵巢癌紫杉醇耐药株
HO-8910/Taxol人卵巢癌紫杉醇耐药株
HCT8/Taxol人结肠癌紫杉醇耐药株
A549/Taxol 人肺癌紫杉醇耐药株
hct116/L人结肠癌耐奥沙利铂细胞株
lovo/L人结肠癌耐奥沙利铂细胞株
HCT8/L人结肠癌耐奥沙利铂细胞株
BEL/L人肝癌耐奥沙利铂细胞株
SMMC7721/L人肝癌奥沙利铂耐药株
A549/L人肺癌耐奥沙利铂细胞株
HCT8/FU人结肠癌氟尿嘧啶耐药株
ovo/FU人结肠癌氟尿嘧啶耐药株
SMMC7721/FU人肝癌氟尿嘧啶耐药株
PATU-8988/FU人胰腺癌氟尿嘧啶耐药株
 
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