人广谱细胞角蛋白（P-CK）elisa检测试剂盒常用的方法：双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。
预期应用：ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量.
标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。
加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl，待测样品孔中先加样品稀释液 40μl， 然后再加待测样品 10μl（样品zui终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽 量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 后弃去，如此 重复 5 次，拍干。
加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。
温育：操作同 3。
洗涤：操作同 5。
显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 10 分钟.
终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
检品溶液的制备：
取大黄粉末2克，加乙醇20ml，在沸水浴上回流浸提10分钟，过滤供鉴别用。
2．鉴别试验：
（1）与碱成盐显色反应（Borntrager反应）：取1ml乙醇提取液，加入1ml 10% NaOH溶液，如产生红色反应，加入少量30%过氧化氢液，加热后红色不褪，加酸使呈酸性时，则红色消褪再碱化又出现红色。
注：或取大黄粉末少许，置小试管中，加水1~2ml，加浓H2SO4 2-3滴，置水浴中加热10分钟，冷却，加乙醚1-2ml振摇。用吸管吸取醚液（黄色）于另一洁净试管中，加入NaOH试液1ml振摇，则醚层应褪为无色，碱层（下层）为红色，示有蒽醌类成分存在，如供试的中草药在以上试验中碱水层仅现黄色，可分出碱水溶液，置试管中，加30%H2O2溶液1~2滴，在沸水浴中加热数分钟，混液如能转为橙红色，说明中草药中可能有蒽酚类成分存在。
（2）升华试验：取大黄粉末少许，置载玻片上，玻片两端各放短木棍一小段，然后另取一洁净载玻片，放置于小棍上，注意勿触及下面粉末。然后移置在三足架的铁纱网上小心加热（勿使粉末炭化）至玻片上有升华物凝结为止，取下盖片，使升华物面向上，放于显微镜下观察，可见多数黄色针晶或羽毛状晶体（蒽醌衍生物）。此晶体遇碱液呈红色。
（3）园形滤纸层析：
样品：大黄醇浸液
显色：
1）于自然光下观察色带
2）于紫外光下观察荧光环
3）氨熏，观察是否出现红色环，再置uv下观察荧光环
4）喷0.5%MgAC2甲醇液，于90℃烘5分钟，是否出现橙红或紫红色环。
