硅基磁珠2mL图片注意事项
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定前需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响链的合成,也不影响PCR反应。
Vincristine sulfate硫酸长春新碱
Mangostinα-倒捻子素
Polyphyllin A重楼皂苷I
Allantoin尿囊素
Osthole蛇床子素
Matrine苦参碱
Hyperin金丝桃苷
hypericin from hypericum perforatum金丝桃素
phillyrin连翘苷
Curcumin姜黄素
demethoxycurcumin去甲氧基姜黄素
Artemether蒿甲醚
硅基磁珠2mL图片Dihydroartemisinin双氢
2-(3,4-dihydroxyphenyl)-3-(β-D-glucofuranosyloxy)-5,7-dihydroxy-4H-1-benzopyran-4-one异槲皮苷
quercetin-3-rhamnoside槲皮苷
1,1',6,6',7,7'-hexahydroxy-3,3'-dimethyl-5,5'-bis(1-methylethyl)[2,2'-binaphthalene]-8,8'-dicarboxaldehyde-acetic acid醋酸棉酚
Carnosic acid鼠尾草酸
Imperatorin欧前胡素
3-(3,4-DIHYDROXYPHENYL)ACRYLIC ACID-1-CARBOXY-2-(3,4-DIHYDROXYPHENYL)ETHYL ESTER迷迭香酸
Baicalin黄芩苷
Baicalein黄芩素
Wogonin汉黄芩素
Fraxetin秦皮素
BETA-D-GLUCOPYRANOSIDURONIC ACID汉黄芩苷
13,14-Didehydromatridin-15-one槐果碱
3,3',4',5,7-pentahydroxyflavone槲皮素
Rutin芦丁
7-(2-O-(6-deoxy-alpha-L-mannopyranosyl)-beta-D-glucopyranosyloxy)-2,3-dihydro-4',5,7-trihydroxyflavone柚皮苷
sesamin芝麻素
(5R-trans)-6-(β-D-glucopyranosyloxy)-5,6-dihydro-5-vinyl-1H,3H-pyrano[3,4-c]pyran-1-one龙胆苦苷
Fytic acid植酸
L-DOPA左旋多巴
Paclitaxel紫杉醇