1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
大鼠主动脉平滑肌细胞Rat aortic smooth muscle cells
HUVEC, 人脐静脉内皮细胞HUVEC, human umbilical vein endothelial cells
人脐动脉内皮细胞Human umbilical artery endothelial cells
人脐静脉平滑肌细胞Human umbilical vein smooth muscle cells
人脐动脉平滑肌细胞Human umbilical artery smooth muscle cells
人脐带血单个核细胞Human umbilical cord blood mononuclear cells
小鼠骨髓间充质干细胞(EGFP标记)Mouse bone marrow mesenchymal stem cells (EGFP mark)
人骨髓间充质干细胞(hMSCs)Human bone marrow mesenchymal stem cells (hMSCs)
人间充质干细胞-脂肪Human mesenchymal stem cells - fat
人间充质干细胞-肝Human mesenchymal stem cell of liver
人间充质干细胞-脐带Human umbilical cord mesenchymal stem cell
小鼠神经干细胞Mouse neural stem cells
小鼠海马神经胶质细胞(EGFP标记)Mouse hippocampal glial cells (EGFP mark)
小鼠皮层神经胶质细胞(EGFP标记)Mouse cortical glial cells (EGFP mark)
小鼠神经干细胞(EGFP标记)Mouse neural stem cells (EGFP mark)
人脑微血管内皮细胞Human brain microvascular endothelial cells
人脑血管平滑肌细胞Human brain vascular smooth muscle cells
人海马神经元Hippocampal neurons
人少突胶质细胞Oligodendrocytes
人星形胶质细胞Astrocytes