一站式磁珠法全血 mRNA 提取试剂盒50 次规格实验步骤:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式
离心机,2600×g离心30-60分钟。
一站式磁珠法全血 mRNA 提取试剂盒50 次规格客户提供
●新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
●4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
●详细的背景资料:来源、特点、类型等
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基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证
高纯度RNA/DNA、完整货期
一站式磁珠法全血 mRNA 提取试剂盒50 次规格详细介绍:
一站式磁珠法全血 mRNA 提取试剂盒50 次规格注意事项
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定前需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
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shgoy-5303裂解液IX:真菌/酵母细胞超强裂解液M7969120次
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shgoy-5305真菌/酵母细胞可溶性总核蛋白制备试剂盒M7969320次
shgoy-5306真菌/酵母细胞浆可溶性总蛋白制备试剂盒M7969420次
shgoy-5307真菌/酵母细胞壁可溶性总蛋白制备试剂盒M7969520次
shgoy-5308真菌/酵母细胞壁完全可溶性总蛋白制备试剂盒M7969620次
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shgoy-5311真菌/酵母细胞染色质免疫沉淀分析(CHIP)完全试剂盒(包括抗体)M7969920次
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shgoy-5316生物素真菌/酵母细胞蛋白核酸结合凝胶迁移电泳分析试剂盒M7970420次
shgoy-5317可溶性真菌/酵母细胞膜蛋白(粗提)制备试剂盒M7970520次
shgoy-5318可溶性真菌/酵母细胞膜蛋白(纯提)制备试剂盒M7970620次
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