大提柱式质粒 DNAout 5次图片注意事项
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定前需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响链的合成,也不影响PCR反应。
Rattus norvegicus (Rat)防御素β1(DEFβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)小核糖核蛋白多肽C(SNRPC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)γ-谷氨酰转移酶1(γGT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)乳腺癌易感蛋白1(BRCA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
General间羟肾上腺素(MN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
General垂草扁桃酸(VMA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Rattus norvegicus (Rat)中性粒细胞明胶酶关联脂质运载蛋白(NGAL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
大提柱式质粒 DNAout 5次图片Mus musculus (Mouse)中性粒细胞明胶酶关联脂质运载蛋白(NGAL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)糖抗原72-4(CA72-4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)线粒体肌酸激酶1A(CKMT1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Mus musculus (Mouse)线粒体肌酸激酶1A(CKMT1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)着丝粒蛋白H(CENPH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)抗肌动蛋白抗体(AAA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)棕榈酰化膜蛋白6(MPP6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Rattus norvegicus (Rat)棕榈酰化膜蛋白6(MPP6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Mus musculus (Mouse)棕榈酰化膜蛋白6(MPP6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)视黄醇结合蛋白4(RBP4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Rattus norvegicus (Rat)视黄醇结合蛋白4(RBP4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Mus musculus (Mouse)视黄醇结合蛋白4(RBP4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)骨形成蛋白1(BMP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Mus musculus (Mouse)骨形成蛋白1(BMP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Rattus norvegicus (Rat)骨形成蛋白1(BMP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)基质金属蛋白酶23A(MMP23A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)组织蛋白酶K(CTSK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Rattus norvegicus (Rat)组织蛋白酶K(CTSK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Mus musculus (Mouse)组织蛋白酶K(CTSK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
General8-异构前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)胆囊收缩素A受体(CCKAR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Homo sapiens (Human)肌肌酸激酶(CKM)